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(简答题)

简述双向电泳研究蛋白质组的优缺点。

正确答案

优点:
(1)双向电泳技术,特别是固相pH梯度等电聚焦为第一向的双向电泳技术是当前分辨率最高,信息量最大的电泳技术。目前,一次双向电泳最高可达11000个蛋白点的分辨率;
(2)双向电泳能将组织和细胞中成千上万种蛋白高分辨率,高灵敏度的分离以满足随后的质谱分析,结合质谱鉴定技术可查明大型蛋白复合物各组分,与其他生物技术相结合,可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。
缺点:
(1)低拷贝蛋白质的鉴定受限;
(2)极酸或极碱蛋白的分离比较困难;
(3)分子质量极大(>200kDa)或极小(<200kDa)蛋白的分离较难;
(4)难溶蛋白的检测比较困难;
(5)由于蛋白多样性的存在,很难确定一张正常状态的图谱作为病理状态的对照;
(6)重复性仍然不理想;
(7)得到高质量的双向凝胶电泳需要精湛的技术。

答案解析

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