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(简答题)

人DNA双链断裂后的修复机制。

正确答案

对于DNA双链断裂损伤,细胞必须利用双链断裂修复,即重组修复,重组修复分为同源重组(homologousrecombination,HR)和非同源末端连接(non-homologousendjoining,NHEJ)。DNA双链断裂后,细胞中存在姐妹染色体时,则通过同源重组的方式进行修复,如细胞中不存在姐妹染色体时,则通过非同源末端连接的方式进行修复。
同源重组的修复机制如下:
DNA断裂末端被MRE11–Rad50–NBS1结合形成复合体,然后断裂末端5ˊ端被复合体中的MRE11剪去,留下一个伸出的3ˊ端单链,这个单链与RAD52结合。RAD52是一个大分子七聚体,保护伸出的DNA末端不会被降解。RAD52环后面的单链DNA被RAD51结合形成核蛋白细丝(nucleoproteinfilament),它能够进行链的交换。RAD51核蛋白细丝是一个松散的螺旋结构,它能够使受损DNA链更容易进入另一个染色质上的同源DNA双链。未受到损伤的DNA单链与受损的DNA单链形成异源双链核酸分子,然后通过分枝迁移(branchmigration)进行延伸,替代原来的互补链,最终,被替换的链被内切核酸酶切断,供体链与受体链5ˊ端相连接。第2个损伤链可以由二次重组来进行修复,也可以由被替换的受体链为模板,合成新的互补链。
非同源末端连接的修复机制如下:
Ku70/Ku80异二聚体形成空环结合在受损DNA末端,然后将DNA-PKcs募集过来,DNA-PKcs是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。DNA-PKcs和核酸酶Artemis形成复合物,DNA-PKcs使Artemis磷酸化,激活Artemis5′到3′的核酸外切酶活性,切割断裂处的DNA,产生互补的末端,DNA-PKcs将两断端聚集在一起,XRCC4类似因子(XLF)与XRCC4、连接酶Ⅳ同时形成复合物,最后由XRCC4-连接酶Ⅳ催化断裂DNA连接。

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