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(简答题)

什么是细胞培养,应注意哪些问题?

正确答案

在体外模拟体内的生理环境,培养从机体中取出的细胞,并使之生存和生长的技术为细胞培养技术。细胞培养技术是细胞生物学研究方法中最有价值的技术,通过细胞培养可以获得大量的细胞,也可通过细胞培养研究细胞的运动、细胞的信号传导、细胞的合成代谢等。
细胞培养的突出特点是在离体条件下观察和研究细胞生命活动的规律。培养中的细胞不受体内复杂环境的影响,人为改变培养条件(如物理、化学、生物等外界因素的变化)即可进一步观察细胞在单因素或多因素的影响下的生理功能变化。然而,细胞在体外环境的局限性,又使细胞的形态与功能不能与体内的同类细胞完全等同。体外培养细胞必需注意三个环节∶物质营养、生存环境和废物的排除。体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分,但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括:促细胞生长因子(如EGF)、促贴附物(如层粘连蛋白)和其它活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。体外细胞培养必需模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指∶无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种∶O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。

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