转基因技术:是指在DNA操作过程中用到的:重组子构建技术、重组分子导入动植物体内的转化技术、转基因在受体细胞染色体上的稳定整合及可靠表达技术。
(一)外源基因的构建:转移到受体中的外源基因,一般包括三部分:启动子、目的基因和转录终止信号。
(二)外源基因的导入:显微注射法,电穿孔转化法,精子介导法,基因枪转化法,病毒(噬菌体)颗粒转导法,组织注射法。
(三)源基因的检测,外源基因导入的检测包括DNA斑点杂交,PCR阳性检测技术;外源基因整合的检测采用Southern技术,以外源DNA作为探针,进行杂交检测,可以检测到外源基因整合到基因组;外源基因表达产物的检测包括特异性mRNA的检测,报告基因的酶法检测,免疫学检测,表达产物的生物学活性检测。