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(简答题)

简述多色荧光标记引物法的原理。

正确答案

荧光标记引物法是指将荧光染料预先标记在测序反应所用引物的5′端。当相同碱基排列的寡核苷酸链作为骨架分别被4种荧光染料标记后,便形成了一组(4种)标记引物。这四种引物的序列相同,但5′端标记的荧光染料颜色不同。在测序反应中,模板、反应底物、DNA聚合酶及标记引物等按A、T、C、G编号被置于4支微量离心管中,A、T、C、G四个测序反应分管进行,上样时合并在一个泳道内电泳。特定颜色荧光标记的引物则与特定的双脱氧核苷酸底物保持对应关系。

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