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(简答题)

简述细胞工程基本操作的三种技术及其具体方法。

正确答案

(1)无菌操作技术
①无菌室定期消毒;实验前后消毒。
②进无菌室前换鞋、更衣、戴帽,操作时双手戴无菌手套。所有操作在超净台上进行。
③实验用生物材料彻底消毒与除菌。
④实验用一切器械、器皿和药品灭菌或除菌。
(2)细胞培养技术
①取材和除菌。淋巴细胞直接抽取;植物材料取材后,动物材料取材前表面清洗消毒;特定酶处理得分散细胞。
②生物材料接种于培养基中后放入培养室或培养箱中培养,至一定生物量时收获或传代。
(3)细胞融合技术
①制备原生质体。除去M及植物细胞细胞壁。动物细胞无壁。
②诱导细胞融合。两亲本原生质体悬浮液调至一定细胞密度;按1:1比例混合,用物理、化学或生物法促进融合。
③筛选杂合细胞。将混合液移到特定筛选培养基上使杂合细胞长出,未融合细胞不生长。得具有双亲遗传特性的杂合细胞。

答案解析

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