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(简答题)

以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取的主要流程及操作注意点。

正确答案

(1)主要流程:使用PEG/盐系统提取胞内酶时,可先使细胞碎片分配到下相,使蛋白质分配在上相;分离后,上相中的蛋白质可以加入适当的盐,进行二次双水相萃取,目的是利用盐相(下相)去除核酸和多糖;上相中的蛋白质进行第三次萃取,通过pH调节,使上相含色素,蛋白质分配在盐相,以便通过超滤将其和主体PEG分离,主体PEG可循环使用。
(2)操作注意点:实验放大的主要依据是分配系数,遇到的主要问题是细胞碎片相的粘度问题、萃取平衡时间以及相分离问题。需要带低速搅拌和溢流装置的混合-沉降系统;上下相分离利用重力沉降能耗成本低,但高粘度体系要选用离心分离;改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物的彻底分离。

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