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(简答题)

线粒体各部分如何分离?

正确答案

线粒体使细胞内一种非常微小的细胞器,要对其各部分进行化学分析,首先必须将其各部分分离开来。完整的线粒体通过差速离心便能分离出来,而各种亚线粒体成分则需要利用密度梯度离心来进行分离。每100g克的组织大约可获得1克线粒体。
分离外膜一般有两种方法,一种通过低渗处理,让线粒体吸水膨胀,直到把外膜张破,然后使剩下内膜和基质收缩;另一种是使用两种去污剂----毛地黄苷和lubrol.毛地黄苷可使完整的内膜与外膜分开,外膜很轻,要用强离心力和低的密度梯度才能分离出。外膜与内膜分开后,便可以对其酶系统进行定位和定性研究,去掉外膜后的线粒体部分仍能进行氧化磷酸化活动,说明氧化磷酸化酶系存在于线粒体内膜上。去污剂Lubrol又可以进一步使线粒体内膜与基质分离。

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