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(简答题)

某同学在实验室因操作不慎,所保藏的Bacillus subitis和Lentinus edodes菌种被E.coli污染了,请问他应该如何将这两种菌种纯化?

正确答案

Bacillus subitis的纯化:
1)制备无菌水和牛肉膏蛋白胨培养基平板,将菌苔刮下,用无菌水制成菌悬液;
2)将菌悬液置于100℃沸水浴中,保温5分钟;
3)将保温后的菌悬液按倍比稀释,使每ml稀释菌悬液中含菌约200-300个,吸取0.1ml稀释菌悬液涂平板,置于30℃下培养2天;
4)待平板上长出菌落后,挑取表面干燥的菌落,镜检并革兰氏染色鉴定该菌落为Bacillus subitis菌;
5)挑出该单菌落,进一步采用平板划线分离纯化。
Lentinus edodes的纯化:将菌丝连同培养基一起挖出,制备PDA平板,在平板中央放置一个已灭菌的牛津杯或空心玻璃管,在牛津杯或空心玻璃管中央接种,待菌丝长出后,切取菌丝尖端纯化,转管。或配制Martin培养基,加入链霉素,配成30μg/mL浓度,接种后取单菌落转管。

答案解析

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