（简答题）
概述荧光定量PCR技术的原理。
正确答案
又称实时PCR技术。该技术在常规PCR基础上，添加了一条标有两个荧光基团的荧光双标记探针，一个标记在探针的5′端称为报告基团(Reporter，R)；另一个标记在探针的3′端称为荧光抑制基团或称淬灭基团(Quencher，Q)。两者可构成能量传递结构，即5′端R发出的荧光信号可被3′端R基团抑制。3′端的-OH已被封闭，不具有延伸的能力。探针引物在无特异性PCR扩增时，荧光信号不改变。在PCR反应开始后，随着链的延长，荧光定量PCR的Taq酶沿着DNA模板移动到荧光标记探针的结合部位，发挥它的5′-3′外切酶活性，将荧光探针切断。一但切断，Q基团的抑制作用消失，从而引起R基团的荧光信号增长，被释放的游离R基团的数目和PCR产物的数量是一对一的关系，因此R基团的荧光信号的强弱就与PCR产物的数量成正比关系。测定出前者就可以推算出后者。这就是荧光定量PCR的原理。在PCR的过程中，连续不断地检测反应体系中的荧光信号的变化，当信号增强到某一阈值时(根据荧光信号基线的平均值和标准差，计算出99.7%的置信度大于平均值的荧光值，即阈值)，此时循环次数(ct)就被记录下来，该循环参数和PCR体系中起始DNA量的对数值之间有严格的线性关系，利用阳性梯度标准品的ct值，制成标准曲线，再根据样品的ct值就可以准确定出起始DNA的拷贝数。
答案解析
略
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（名词解析）
荧光实时定量PCR技术
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荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。荧光定量PCR方法中不是基于FRET原理设计的是（）
（单选题）
荧光定量PCR检测因为具有自动化程度高、易于标准化、产物闭管检测减少污染、定量报告检测结果等诸多优点，现在临床检验中应用越来越广泛，它与常规PCR相比在很多方面都有其特点。检测原理利用了Taq酶5′→3′外切酶活性的是（）
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荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括（）。
（多选题）
荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括（）
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荧光定量PCR仪的荧光检测系统主要包括（）
（多选题）
荧光定量PCR仪的荧光强度减弱或不稳定，可能的原因有（）。
