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(简答题)

小量制备质粒DNA,用质粒中特定的酶切发现切割不动,试分析可能原因及克服方法?

正确答案

最可能的原因:从细菌沉淀或从核酸沉淀中吸上清时注意不够,带了杂蛋白。其最根本的原因是因为细菌的细胞壁成分或核内某些蛋白质可能抑制限制酶活性。克服方法:用酚氯仿对溶液抽提;用离心柱层析法纯化DNA。

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