(一)特异性mRNA的检测
Northern杂交,即RNA-DNA杂交分析,是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。与Southern杂交类似,检测目的RNA的存在与否及含量。
(二)报告基因的酶法检测
(1)报告基因:其表达产物及其功能在未转化的植物细胞中并不存在;其表达产物便于检测。
(2)目前动物基因工程中使用的报告基因一般是编码酶的基因,主要有:β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS基因)、氯霉素乙酰转移酶基因(CAT基因)、胸苷激酶基因(cA)、二氢叶酸还原酶基因(DHFR)等。
(三)免疫学检测
(1)免疫沉淀法
(2)酶联免疫吸附法(ELISA)
ELISA是一种利用免疫学原理检测抗原、抗体的技术。它与经典的以同位素标记为基础的液-液抗原-抗体反应体系不同之处是建立了固-液抗原-抗体反应体系,并采用酶标记。抗原或抗体能结合到固相载体的表面仍保持其活性;抗原或抗体与酶交联成酶标抗原或抗体后,仍分别保持其免疫活性和酶活性。酶标抗原或抗体与相应抗体或抗原反应后,结合在免疫复合物上的酶遇到相应的底物时,可以催化底物的水解、氧化或还原,从而产生有色物质。颜色反应的深浅与相应抗体或抗原量相关。
(3)Western印迹法
(4)固相放射免疫(RIA)法
RIA法是一种定量测定外源表达蛋白的方法。该法具有很高的灵敏度,可检测出1pg的靶蛋白。
(四)表达产物的生物学活性检测
当外源基因的表达产物是一种酶蛋白时,可根据酶的催化反应来确定外源基因的表达与否和表达的程度。常见的有:淀粉酶、碱性磷酸酶、脂肪酶等。
(简答题)
试述外源基因表达产物的检测方法。
正确答案
答案解析
略
相似试题
(单选题)
转基因技术中外源基因表达产物检测不适宜的方法有()。
(判断题)
来源于鱼类自身的启动子和增强子可使外源基因具较高水平的表达或表达组织特异性、时期特异性。
(单选题)
转基因技术中下列外源基因的导入方法中,对鱼类暂不适应的方法是()。
(简答题)
试述转基因技术中外源基因的导入的常用方法及其优缺点。
(单选题)
转基因技术中外源基因整合的检测适宜的方法有()。
(判断题)
转基因鱼所带的外源基因可通过遗传传递给子代,但子代个体间外源基因的拷贝数差异很大。
(名词解析)
外源基因
(单选题)
在转基因鱼构建过程中,关于外源基因及启动子的研究趋势是()。
(判断题)
嵌合体整合的外源基因在世代传递过程中,部分拷贝丢失,不完全按孟德尔方式遗传。