1)同工酶的多态性采用凝胶电泳方法进行分型。
区带电泳:
利用酶蛋白分子的大小和所携带电荷数量(酶蛋白的电荷密度的差异)→Rf。
等电聚焦技术:
根据酶蛋白分子的等电点不同,在pH梯度介质中,酶蛋白分子聚焦在相应的等电点pH位置上,形成狭窄而清晰的区带。
2)凝胶介质上酶区带的显现及鉴定。
直接底物显色法:
常用于测定水解酶,无色底物被酶催化反应转变成有色产物。
荧光染色法:
酶催化下,非荧光底物生成高度荧光的产物或使荧光底物转化成非荧光产物(负荧光染色)。
电子转移染料染色:
酶催化下,同时NAD+或NADP+还原成NADH或NADPH,同时提供电子。染料还原成暗蓝紫色的不溶性甲月替。