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(简答题)

分别用夹层培养法和逐个检出法,从野生型和营养缺陷型混合菌液中检出营养缺陷型菌株

正确答案

(1)夹层培养法:先在培养皿上倒一薄层不含菌的基本培养基,待冷凝后加上一层混有经过诱变处理的菌液的基本培养基,其上再浇一薄层不含菌的基本培养基,使之成为“三明治”状。经培养后,对首次出现的菌落用记号笔一一标在皿底上。然后,再在皿内倒上一薄层完全培养基。再经过培养后所出现的形态较小的新菌落,多数是营养缺陷型。
(2)逐个检出法:把经诱变处理后的细胞涂布在平板上,待长成单个菌落后,用接种针把这些单个菌落逐个依次地分别接种到基本培养基和另一完全培养基上。经培养后,如果在完全培养基的某一位上长出菌落,而在基本培养基的相应位置却不长,说明这是一个营养缺陷型突变株。它们的共同原理是:在基本培养基中,野生型的菌株能正常生长,而营养缺陷型的菌株不能生长。因此,将诱变后的菌株先在基本培养基上培养一段时间后,再用完全培养基培养,就可除去野生型菌株,而得到营养缺陷型

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