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(简答题)

蔗糖、甘油和氯化铯都是密度离心分离中的介质,它们在性质上和使用上有什么不同?

正确答案

CsCl可自行形成密度梯度,所以不必特别制备密度梯度,只要将待分离的样品与之混匀即可。在离心的过程中,具有不同密度的颗粒随CsCl密度梯度的形成重新分配;而蔗糖和甘油要人工置备密度梯度。蔗糖和甘油的最大密度为1.3g/cm3,所以只能用于分离密度在
1.3g/cm3以下的细胞器或细胞结构;而氯化铯的最大密度可达1.9g/cm3以上,可用于分离密度大于1.3g/cm3的DNA分子。在原理上,由于具有不同密度的颗粒随CsCl密度梯度的形成重新分配,所以又称为浮力密度离心(buoyant density centrifugation);而蔗糖和甘油则是在被离心的物质在下降的过程中由于密度的不同而被阻止在不同的部位,故是重力密度离心。

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