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(简答题)

简述紫外可见光分光光度法在蛋白质研究方面的作用。

正确答案

蛋白质生色团主要有肽基团、某些氨基酸侧链和某些辅基等三类。
1)肽基团典型跃迁吸收带有3个:210-220nm,吸收系数约100,属n→π*跃迁;190nm附近,吸收系数约7000,属π→π*跃迁;175nm附近,属n→σ*跃迁。
2)蛋白质侧链研究,主要由酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸以及组氨酸、胱氨酸等贡献。酪氨酸274nm,吸收系数约1400,色氨酸较复杂240-290nm至少存在3种电子跃迁,苯丙氨酸在257nm,吸收系数约200。上述氨基酸由极性环境移入非极性环境,吸收峰波长及吸收系数增加氨基酸链基团由于溶剂pH变化带电荷时,吸收峰波长及吸收系数增加
3)某些辅基在可见光范围内有强吸收带,血红素、黄素和一些金属蛋白络合物。特点是吸收系数较大,可用于检测。

答案解析

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