原理是采用核苷酸链终止剂—2,,3,-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH,一旦参入到DNA链中,此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则,每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时,就有两种可能性,一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止;二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长,直至参入下一个ddNTP。根据这一方法,就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后,聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。
(简答题)
简述利用双脱氧末端终止法(Sanger法)测定DNA一级结构的原理与方法?
正确答案
答案解析
略
相似试题
(简答题)
SANGER双脱氧链终止法的原理是什么?
(单选题)
双脱氧合成终止法测DNA序列时,加A体系中所得到的DNA片段都是以哪个核苷酸结尾()。
(填空题)
双脱氧合成终止法是在不同体系的底物中加入一种(),在DNA合成过程中聚合酶随机终止合成反应,这个体系中每一条链都以()结尾,经电泳后可()读出DNA的序列。
(名词解析)
TUNEL 法[terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling](末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP 缺口末端标记测定法 )
(单选题)
提出双脱氧法测DNA一级结构的科学家是()。
(简答题)
什么是Sanger法测序(一代测序)?
(多选题)
下列哪一项为用Sanger’s法作DNA定序所需要的试剂()
(简答题)
简述两种饲料原料利用方形法配制全价饲料的步骤?
(简答题)
简述活性污泥法的主要过程及利用静止期微生物的道理。