(1)抗药性筛选
这是利用载体DNA上组装的抗药性选择标记进行筛选的方法。
常用的抗生素筛选剂:氨苄青霉素(ampicillin,Ap或Amp);氯霉素(chloramphenicol,Cm或Cmp);卡那霉素(kanamycin,Kn或Kan);四环素(tetracymic,Tc或Tet);链霉素(strentomycin,Sm或Str)。
(2)插入失活筛选法
检测克隆载体携带有外源DNA的通常方法是插入失活。经过抗药性筛选获得的大量转化子中既包含所需要的重组子,也包含非重组子。为了进一步筛选出重组子,可利用质粒载体的抗药性进行再次筛选。
(3)插入表达筛选法
与插入失活相反,插入表达法是外源目的基因插入特定载体后,能激活用于筛选操作的标记基因的表达,由此进行转化子的筛选。设计载体时,在筛选标记基因前面连接一段具有抑制作用的负调控序列,插入外源DNA将使该负调控序列失活,其下游的筛选标记基因才能表达。
(4)环丝氨酸筛选
这种筛选方法只使用于抗四环素的基因插入失活的重组克隆筛选。
(5)显色反应筛选法
显色反应可以在平板上或膜上直接显示出重组克隆,不仅方便而且灵敏。
(简答题)
如何筛选重组体?
正确答案
答案解析
略
相似试题
(简答题)
如何筛选与鉴定重组体?
(单选题)
用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达。
(简答题)
重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么?
(填空题)
基因工程操作流程主要包括()、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。
(单选题)
下列三种方法中,能有效区分重组子与非重组子的是() I限制性酶切;IIPCR扩增;III抗药性筛选
(名词解析)
重组体
(简答题)
重组体分子的选择方法主要有哪些?并简单阐述其原理。
(单选题)
第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是()
(单选题)
DNA重组的顺序是()①用连接酶将外源DNA与载体连接。②培养细胞以扩增重组DNA。③通过转化将重组DNA引入受体细胞。④筛选出含有重组体的克隆。