⑴稀释液的配制
①冷冻稀释液：取80ml5.7%蔗糖溶液，加入20ml卵黄液，配成100ml含卵黄20%的冷冻稀释液液，加入0.003g青霉素，0.005g链霉素，摇匀，4℃预冷保存。
②冷冻保护剂：甘油、DMSO、二酰基乙酰胺。甘油冷冻保护液：取出17.2ml冷冻稀释液，加上2.8ml的无水甘油，配成含甘油14%的冷冻保护剂液，充分摇匀后，4℃预冷保存。
⑵精液采集
采用背腹式按摩法采集种公鸡精液，采集过程中要求精液无粪便，无血液，饲料等污染。
采集后用棉花和纱布包好，置于保温杯中，送回实验室处理。
⑶精液的稀释
⑷精液品质检查
⑸冷冻精液制作
鲜精经过品质检测合格后，方可进行冷冻精液的制作。
①精液冷冻前的准备：取1ml的鲜精，用相同温度的冷冻稀释液进行1：3的稀释后，然后用纱布包上10层，放在0-5℃左右的冰箱中预冷1小时左右，再用相同温度的含甘油的冷冻保护剂（或含有DMSO的冷冻保护液）进行1：1的稀释。
②接着在5℃的冰箱中进行平衡2个半小时。平衡时间可以在1个小时至3个小时内变动。
③精液冷冻：用泡沫盒盛装液氮，在距离液氮面1–2cm处架上铜丝网，待铜丝网充分冷却后，用移液枪开始滴冻，每滴0.25ml。滴冻后加盖，熏蒸2分钟，然后将颗粒浸入液氮中。
