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(简答题)

基因克隆是如何使含有单个基因的DNA片段得到纯化的?

正确答案

大分子质量的DNA会含有许多特殊限制性内切核酸酶的限制位点,因此用一种限制酶处理一完整染色体或整个基因组会产生许多不同的DNA片段,每一个片段带有基因组的一个不同的基因或一个不同的小片段。当全部片段与用同种限制酶处理过的载体分子混合时(如图所示),每个片段将插入一个不同的载体分子(如一个质粒)。同样地,当用这些质粒转化宿主细胞时,每个宿主细胞将只接收一个质粒DNA分子,而筛选出的含重组质粒的每个菌落实际上会含有某一特异的供体DNA片段的多个拷贝。一旦带有待研究的特定基因的克隆被确认了,此重组DNA分子可从宿主细胞中提取出来进行纯化。

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