抗生素抗性筛选、抗性的插入失活、兰-白斑筛选或PCR筛选、差式筛选、DNA探针
多数克隆载体均带有抗生素抗性基因(抗氨苄青霉素、四环素)。当质粒转入大肠杆菌中后,该菌便获得抗性,没有转入的不具有抗性。但不能区分是否已重组。
在含有两个抗性基因的载体中,如果外源DNA片段插入其中一个基因并导致该基因失活,就可用两个分别含不同药物的平板对照筛选阳性重组子。如pUC质粒含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。
(简答题)
基因文库的构建对重组子的筛选举出3种方法并简述过程。
正确答案
答案解析
略
相似试题
(填空题)
基因文库的筛选是指通过某种特殊方法从()中鉴定出含有所需重组DNA分子的特定克隆的过程。
(单选题)
获得目的基因的一种战略是从基因文库中筛选,下列程序中用于创建基因文库的是()。
(简答题)
什么是基因文库?简述其构建的基本步骤。
(单选题)
下列哪一种方法不能用于从基因文库中寻找目的基因()
(单选题)
DNA重组通常包括如下五个步骤: ⑴获得需要的目的基因(外源基因)。 ⑵用重组DNA分子(重组质粒)转化受体细胞,使之进入受体细胞并能够在受体细胞内复制和遗传。 ⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等,最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。 ⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用,形成重组DNA分子,并对其加以克隆和筛选。 ⑸对获得外源基因的受体细胞(转化子)进行筛选和鉴定。 上述五个步骤按通常的操作技术应依()顺序进行。
(填空题)
用逆转录方法构建的cDNA文库不具有(),但有启动子与终止子。
(判断题)
不同来源的、无关的基因在实验室中可以按人的愿望进行重组构建。
(单选题)
在进行DNA重组实验中,首先要获得目的基因,一般不使用下面哪种方法()。
(简答题)
何谓基因工程?阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中,如何筛选含有目的基因的宿主细菌?