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(简答题)

简述PCR-SSCP方法。

正确答案

CR-SSCP法:是一种基于单项链DNA构象差别的快速、敏感、有效的检测基于点突变的DNA多态方法。其基本原理是对已知基因点突变的遗传病,在其突变位点附近设计引物进行PCR扩增,将扩增的产物取出一部分,在96%的甲酰胺中变性,然后在不含变性剂的中性聚丙烯酰胺凝胶电泳中电泳,由于单链DNA中碱基对或聚集,当温度或变性剂等环境发迹会引起不同的构象。因此,相同长度的单链DNA因其碱基顺序不同,甚至单个碱基的差异会形成不同的构象,从而导致电泳的泳动速度不同。如靶DNA中发生碱基替代等改变时会出现泳动变位,从而鉴别出有无基因突变。

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