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(简答题)

简述PCR的原理及其应用。

正确答案

PCR技术是模拟体内条件下,应用DNA聚合酶反应特异性扩增某一DNA片段的技术。它根据待扩增区域两端已知序列合成两个与模板DNA互补的核苷酸引物,这一单链引物的序列决定了待扩增片段的特异性和片段长度,当有模板DNA存在时,引物便可在一定的复性温度下特异地与热变性形成单链的DNA模板互补形成“退火”。当有DNA聚合酶和dNTP存在时,便可在一定条件下,按5(→3(方向从引物端合成DNA链,从而可以产生倍增的DNA片段,当经过30~35个周期后便可产生100万倍以上的所需DNA片段。由于PCR扩增技术的快速、简便、准确、可靠,因此,该技术已广泛应用于遗传病的基因诊断,病原体的检测,肿瘤的DNA诊断,法医学亲权鉴定,性别鉴定以及在DNA水平上研究生物进化等。

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