组培中的污染途径有以下几种:
(1)户外风大,菌类进屋机会多。有风就有沙,有沙就有尘,有尘就有菌,菌尘共存,这是菌类进屋的主要原因之一。
(2)屋内太潮,菌类繁衍多。需保持室内空气干燥,如使用空调“除湿”功能,也可减少真菌生长繁殖。
(3)人员带菌多。在整个操作室内,人员可说是最大的带菌者,不管在毛发或是衣服等地方,都隐藏着数不清的菌类。在进入操作室前,最好能对作业人员进行清洁处理,比如换上干净的白大褂,换上实验室的鞋,衣服鞋每星期洗一次,上超净台前手要用肥皂清洗两遍,接种前手再用酒精擦拭一遍。
(4)屋内不干净。紫外线能杀灭或抑制真菌生长,因此应在每次接种前进行20分钟的紫外灯消毒。
(5)清理屋内带菌组培苗。在植物病害中,真菌所引起的病害尤其严重,且因会产生孢子,随着空气飘散。一旦落入适当的环境下,一粒小小的孢子便会扩大成一个菌落,污染整个组织培养瓶。因此一旦有真菌污染的组培苗,就要用高压灭菌器彻底消灭,以防扩散。
(6)接种不正确。不正确操作也会增加污染机率,如开盖太快,灭菌不够,操作过慢等。接种过程应该轻开盖,快操作。