M.RNA差异显示技术基于逆转录PCR(RT-PCR)而建立:抽提配对样品如正常和疾病细胞内mRNA(或总RNA),分别逆转录成为cDNA,然后行PCR随机扩增;一条引物为oligo(dA),能与单链cDNA5’端oligo(dT)结合,另一条为随机引物,能与3’端互补核苷酸序列结合,因此经过RT-PCR扩增后,能将mRNA逆转录为cDNA、扩增获得双链cDNA及其不同PCR产物;扩增产物经过凝胶电泳分析,比较组间扩增产物异同,回收差异片段为探针在cDNA文库或基因组文库中筛选相关基因,从而确定这些基因在疾病过程中的参与情况。
优点:简单易行;灵敏度高;重复性好;多能性;快速。
缺点:假阳性率高,达70%以上;逆转录产物仅为mRNA3’非翻译区,需要进一步的文库筛选确定有关基因。
(简答题)
简述mRNA差异显示筛选差异表达基因的基本原理及其优、缺点。
正确答案
答案解析
略
相似试题
(名词解析)
mRNA差异显示
(简答题)
简述反义RNA、RNA干扰及核酶三种基因干预方法的差异。
(单选题)
外源基因表达的基本流程是()。 ①重组表达载体导入宿主细胞; ②目的基因的获得; ③重组表达载体的筛选与认; ④目的基因与载体的重组; ⑤目的基因的表达。
(单选题)
用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表达。
(单选题)
基因诊断与传统诊断方法的主要差异在于()。
(单选题)
来源不同(父方、母方)的基因在后代表现出功能差异的现象称为()。
(填空题)
埃索美拉唑对不同代谢基因型人群的代谢差异()。
(简答题)
工程动物细胞系的建立:基本过程,表达载体设计,转化与培养方案筛选和鉴定方法。它们与基因工程微生物的异同是什么?
(单选题)
常染色体的基因在不同性别的个体中表型存在差异的现象称为()。