首页学历类考试大学农学
(简答题)

简单说明DNA重组技术中的蓝白斑筛选原理。

正确答案

蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法:是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后,有重组质粒的细菌形成白色菌落。

答案解析

相似试题

  • (填空题)

    在DNA重组技术中应用的某些基本酶类进行操作,这些酶被称作()。常用的工具酶包括()、()、()、()、()、()。

    答案解析

  • (简答题)

    简单说明热解析处理技术的特点和适应性。

    答案解析

  • (简答题)

    简单说明污染地下水的抽水处理(pumpandtreat)修复技术的主要流程以及适用条件。

    答案解析

  • (简答题)

    试举便说明日常生活中的防腐、消毒和灭菌及其原理?

    答案解析

  • (简答题)

    农业生态工程中的技术经济分析应用到了哪些基本原理?

    答案解析

  • (简答题)

    DNA碱基比例测定法鉴定微生物的原理

    答案解析

  • (简答题)

    简单说明叶绿体的结构及其功能。

    答案解析

  • (填空题)

    若算出简单相差系数大于1时,说明:计算中出现了()。

    答案解析

  • (单选题)

    基因中的DNA主要影响蛋白质的()。

    答案解析

快考试在线搜题