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(简答题)

(a)体外DNA合成反应中加入单链结合蛋白(SSB)通常会增加DNA的产量,解释原(b)合成反应一般在体外65℃条件下进行,通常采用生长在高温环境中的细菌中分离出的DNA多聚酶,这有何好处?

正确答案

(a)用于DNA体外合成的单链DNA模板可能形成发夹环那样的二级结构。SSB通过与单链模板的结合阻止了双链结构的形成。在SSB存在下使DNA成为DNA聚合酶的一个很好的底物。
(b)在高温条件下体外合成DNA的产量会增加,因为在模板中形成二级结构的可能性变小了。65℃温度是足以阻止二级结构的形成但是还没有高到使新合成的DNA形成的双链区变性的程度。来自生长于高温条件下的细菌的DNA聚合酶可应用于上述反应,因为在65℃它们是具有活性的,而在这个温度下来自于其它细菌的DNA聚合酶都失活了。

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