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(简答题)

叙述外植体灭菌和接种的程序。

正确答案

(1)外植体灭菌的程序先在准备室对外植体进行预处理,去掉不需要的部分,将准备使用的植物材料在流水中冲洗干净。将外植体拿入接种室后放进70%的酒精中,约30s后用无菌水冲洗1次,再在0.1%的升汞(HgCl2)中浸泡5~10min,或在10%的漂白粉澄清液中浸泡10~15min,然后用无菌水冲洗3~5次。
(2)接种程序:
①接种室消毒(紫外灯照射灭菌20~30min)和开启超净工作台。
②洗手灭菌,并在缓冲室换上已经灭菌的白色工作服和拖鞋,戴工作帽和口罩。
③进入接种室,用70%的酒精擦洗双手、接种台和一切需放上工作台的所有器具,对外植体进行灭菌处理。
④点燃酒精灯,将接种钩、剪刀、镊子放入不锈钢盘或瓷盘内烧灼,冷却后备用。
⑤将外植体放入经烧灼灭菌的不锈钢盘或瓷盘内处理。
⑥烧灼瓶口和塞子,将培养瓶倾斜拿稳,打开塞子,用镊子将接种材料送入瓶内,用接种钩将材料压入培养基中,烧灼瓶口和塞子并上塞。

答案解析

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