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(简答题)

已知一个九肽的氨基酸顺序是:Ala-Pro-lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly,在实验室只有氨基酸分析仪,而没有氨基酸顺序测定仪的情况下,如何使用(1)羧肽酶A或B;(2)氨肽酶;(3)2,4二硝基氟苯(FDNB);(4)胰蛋白酶;(5)胰凝乳蛋白酶,来验证上述肽段的氨基酸顺序。

正确答案

用两种羧肽酶和氨肽酶作用此九肽,都不能释放出氨基酸,证明了第2位和第八位的残基均为脯氨酸;用FDNB可以测得该肽的N末端为Ala,用胰蛋白酶作用可得到Ala,Pro,Lys组成的三肽,这表明了第三位的残基为Lys;同时得到一段五肽和游离的Arg,这提示了Arg是第四位的残基。用胰凝乳蛋白酶作用后,可得到一段六肽和一段三肽,同时也确认了第六位残基是带芳香性侧链的Tyr。由六肽的氨基酸组成测得,确定其中含有Val,很自然的可认定这残基应是第五位的残基。用FDNB证明了酶解后所得三肽的N末端,即九肽的第七位残基,是Glu后,九肽的C末端也肯定是Gly。

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