①无菌操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作，减少走动，避免尘埃飞扬。
②无菌操作前，工作人员要戴好帽子和口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣，戴无菌手套。
③进行无菌操作时，应首先明确无菌区、非无菌区、无菌物品的概念。无菌区指经过灭菌处理且未被污染的区域。非无菌区指未经过灭菌处理，或虽经过灭菌处理但又被污染的区域。无菌物品指经过物理或化学方法灭菌后保持无菌状态的物品。
④无菌物品必须与非无菌物品应分开放置。并且有明显标志；无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外需标明物品名称、灭菌日期，并按失效日期先后顺序摆放，无菌包的有效期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。
⑤进行无菌操作时，操作者身体应与无菌区保持一定距离；取放无菌物品时，应面向无菌区，取用无菌物品时应使用无菌持物钳；手臂应保持在腰部水平或台面以上，不可跨越无菌区。手不可接触无菌物品；无菌物品一经取出，即使未使用，也不可放回无菌容器内；避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏，如用物疑有或已被污染，应予更换并重新灭菌；非无菌物品应远离无菌区。
⑥一套无菌物品只供一位患者使用一次。
