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(简答题)

DNA聚合酶Ⅰ在基因克隆中的作用。

正确答案

DNA聚合酶I(DNA polymerase I)是从大肠杆菌中发现的第一个DNA聚合酶,分子量为109kD。它能以DNA为模板,以4种脱氧核苷酸为原料(dATP、dCTP、dGTP和dTTP)以及Mg2+的参与下,在引物的游离3ˊ-OH或缺口的3ˊ端上合成DNA,方向是5ˊ→3ˊ。该酶将与模板配对的相应脱氧核苷酸连接在引物的3ˊ-OH上,形成3ˊ,5ˊ磷酸二酯键。这个酶除有5ˊ→3ˊ聚合酶活性外,尚有3ˊ→5ˊ及5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性。由于它具有5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性,当用缺口平移法(nick translation)标记DNA探针时,常用DNA聚合酶I。

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    DNA聚合酶Ⅰ酶除有5ˊ→3ˊ聚合酶活性外,尚有()核酸外切酶活性。

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    DNA聚合酶Ⅰ没有3ˊ→5ˊ核酸外切酶活性。

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