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(简答题)

简述Sanger双脱氧链终止法的基本原理。(聚丙烯酰胺凝胶电泳模式图)

正确答案

(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5’端到3’端聚合(DNA聚合酶参与了细菌修复DNA合成过程。);
(2)可延伸的引物必须能提供游离的3’-OH末端,双脱氧核苷酸由于缺少游离的3’羟基末端,因此会终止聚合反应的进行。如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应,则会获得4组长度不同的DNA片段,通过比较所以的DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。

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