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(简答题)

Southern杂交一般过程及影响杂交因素。

正确答案

Southern杂交操作步骤:
(1)用限制性内切酶酶切DNA,经凝胶电泳分离各酶切片段;
(2)转膜:将DNA片段转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上;
(3)预杂交:封阻滤膜上非特异性位点;
(4)杂交:让探针与同源DNA片段特异性结合;
(5)洗脱:去除非特异性结合的探针;
(6)自显影检查目的DNA所在的位置。
Southern杂交影响因子
1)、目的DNA在总DNA中所占的比例
2)、探针的大小和标记效率
3)、转移到滤膜上的DNA量
4)、探针与靶DNA的同源性

答案解析

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