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(简答题)

试述血清淀粉酶碘-淀粉比色法测定原理及注意事项。

正确答案

血清(或血浆)中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1,6糖苷键支链的糊精。在有足够量基质的条件下,反应后加入的碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较其吸光度,从而推算出淀粉酶的活力单位。注意事项:
①草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶活性有抑制,肝素无抑制作用。
②酶活性在400U以下时与底物的水解量成线性,如测定管吸光度小于空白管吸光度一半时,应将血清量加大稀释倍数或减少血清加入量,测定结果乘稀释倍数。
③本法亦适用于其他体液淀粉酶的测定。
④唾液含高浓度淀粉酶,须防止混入。
⑤淀粉溶液若出现混浊或絮状物,不能再使用。

答案解析

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