论述自杀基因治疗的原理及四环素诱导的TK/GCV自杀基因系统在肿瘤基因治疗中的应用。

自杀基因治疗是恶性肿瘤基因治疗的主要方法之一。原理：将“自杀”基因导入宿主细胞中，这种基因编码的酶能使无毒性的药物前体转化为细胞毒性代谢物，诱导靶细胞产生“自杀”效应，从而达到清除肿瘤细胞的目的。“自杀基因”导入后，不仅使转导了“自杀基因”的肿瘤细胞在用药后被杀死，而且与其相邻的未转导“自杀基因”的肿瘤细胞也被杀死。自杀基因治疗的前提条件是“自杀基因”的表达必须局限于肿瘤细胞中，而不伤及正常细胞。
自杀基因转移常用方法有：
①利用免疫脂质体、受体介导等技术进行定向基因转移。
②利用病毒载体进行基因转移。
③瘤内直接注射。
四环素抗性操纵子系统原理：四环素抗性基因的转录受Tet阻遏蛋白的负调控。无四环素存在时，阻遏蛋白与四环素抗性操纵子序列结合阻断四环素抗性基因的表达。四环素存在时，阻遏蛋白与四环素具有极高的亲和性，造成阻遏蛋白对四环素抗性操纵子阻遏解除，使四环素抗性基因的转录得以进行。四环素诱导的Tet-On系统：转录激活物改造了原阻遏蛋白的四环素结合特性，即与四环素结合时才能与对应的表达调控元件结合，而发挥转录激活作用。TK/GCV单纯疱疹病毒（herps simplex virus，HSV）Ⅰ型胸苷激酶（thymidine kinase，tk）基因编码胸苷激酶，特异性地将无毒的核苷类似物丙氧鸟苷（ganciclovir，GCV）转变成毒性GCV三磷酸核苷，后者能抑制DNA聚合酶活性，导致细胞死亡。

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