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(简答题)

简要叙述PCR-SSCP技术的原理。

正确答案

聚合酶链式反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术为分子生物学的研究提供了一个简单、快捷、经济的手段。在该技术中,首先利用PCR技术扩增目的DNA,扩增时利用引物标记法或碱基掺入法使扩增的产物带有标记,如荧光物质、同位素、生物素等。然后将扩增产物变性并进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,区别扩增产物一定长度核苷酸的单链DNA的碱基变化。ssDNA因碱基序列的变异而导致构象改变,其泳动速度必然发生改变,从而将变异的DNA与正常的DNA区分开来。该技术的优点是无需经特殊的限制性内切酶作用,直接对PCR扩增产物或其他方法制备的DNA片段进行分离,测出单链的突变点。

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