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(简答题)

将Asp(pI=2.98)、Gly(pI=5.97)、Thr(pI=6.53)、Lys(pI=9.74)的pH为3.0的柠檬酸缓冲液,加到预先用同样缓冲液平衡过的阳离子交换树脂上,然后用该缓冲液洗脱此柱,问这四种氨基酸将按何种顺序洗脱?

正确答案

在pH为3.0上述四种氨基酸带电状态分别为Asp(0)、Gly(+)、Thr(+)、Lys(++),因而与阳离子交换树脂结合的牢固程度从小到大排列为:
Asp、Gly≈Thr、Lys;因Thr为亲水氨基酸,随洗脱液的流动较Gly更易洗脱,故四种氨基酸的洗脱顺序为:Asp→Thr→Gly→Lys。

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