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(简答题)

什么是扣除杂交?其基本原理是什么?

正确答案

概念:将含目标基因的组织或器官的mRNA群体作为待测样本(Tester),将基因表达谱相似或相近但不含目标基因的组织或器官的mRNA群体作为对照样本(Driver),将Tester和Driver的cDNA进行多次杂交,去掉在二者之间都表达的基因,而保留二者之间差异表达的基因。
原理:一种细胞的总mRNA反转录制备的cDNA与另一细胞的总mRNA混合形成cDNA-RNA杂交分子通过羟基磷灰石柱被扣除,未杂交的单链cDNA流出柱子外,其对应的低丰度mRNA得以克隆。

答案解析

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