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(简答题)

简述液氮超低温保藏法的原理及方法。

正确答案

原理:液氮温度为-196℃,远低于新陈代谢停止的温度(-130℃),在此条件下菌种生长繁殖、代谢全部停止,不会产生变异。是一种长期保存菌种的方法。
方法:待保藏菌种制备菌悬液,加入甘油作为保护剂,甘油终浓度为10%;然后冻结,从0℃到-35℃,其降温速度为每分钟1℃,这样可以使细胞内的自由水通过膜渗出而不形成冰晶刺破细胞;然后放入液氮保存;重新培养时,需将安瓿管在35~40℃水浴中迅速解冻,打开安瓿管,转移菌种至适宜的培养基培养。

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