单克隆抗体的制备：①动物免疫与亲本细胞的选择；②细胞融合：淋巴细胞杂交瘤的制备；③杂交瘤细胞的筛选：有限稀释法等；④单克隆抗体的制备和冻存；⑤单克隆抗体的纯化
亲本细胞的选择：①骨髓瘤细胞：一般不分泌抗体，能在体外无限繁殖和连续继代培养，且为HGPRT－（次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶）或TK－（胸腺嘧啶核苷激酶）缺陷。多用BALB/C小鼠的骨髓瘤细胞。②淋巴细胞：经过免疫处理的淋巴细胞，多用大鼠或小鼠。③免疫方法：对细胞或微生物抗原可直接注射如小鼠体内，可溶性蛋白抗原可与等量的福氏完全佐剂混合乳化后，注入到动物体内。
细胞融合：将免疫脾细胞和小鼠骨髓细胞以2：1或10：1的比例混匀于50ml锥形离心管内，1200rpm离心；10分钟，尽量吸净上清液，用手指轻击管壁，使管底沉淀的细胞铺展成薄层，在室温条件下边轻轻振摇离心管边在60秒钟内逐滴加入50%的PEG0.5ml，随后静置90秒，再于5分钟内边振摇边逐滴加入5－10ml不含血清的培液或盐水缓冲液，以终止PEG的作用，再静置10分钟。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞：细胞团块分散后，加HAT溶液，即可加入有饲养细胞的96孔塑料培养板内每孔0.1ml，用HAT选择性培养时隔4－5天换液，8-10天后可以选择检测。
HAT选择系统：HAT是含一定浓度次黄嘌呤（H）、氨基喋呤A.及胸腺嘧啶核苷（T）的一种选择性培养基，其中三种成分与细胞DNA合成有关。
（简答题）
简述单克隆抗体的主要技术路线。
正确答案
答案解析
略
相似试题
（简答题）
简述克隆哺乳动物的技术路线？
（单选题）
单克隆抗体技术的核心部分是（）。
（名词解析）
monoclone antibody（单克隆抗体技术）
（多选题）
制备单克隆抗体所要涉及的细胞生物学技术有（）
（简答题）
什么是单克隆抗体？简述制备步骤。
（单选题）
建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列技术构建的：（）
（填空题）
制备单克隆抗体所涉及到的生物技术包括：动物细胞（）与动物细胞培养
（单选题）
在1975年有人将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得能分泌单克隆抗体的杂交瘤，这种单克隆抗体制备技术的发明者是（）
（填空题）
产生单克隆抗体的杂交瘤技术，就是将（）细胞与（）细胞融合，融合细胞既有前者不断分泌的活性，又有后者所指令的（）与结合的专一性。
