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(简答题)

什么是单克隆抗体?简述制备步骤。

正确答案

单克隆抗体是指由一纯系B淋巴细胞克隆,经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子。步骤:
①选择亲本细胞株。骨髓瘤细胞必须选用HGPRT酶缺陷型,因为它们不能在HAT培养基上生长。B细胞是用绵羊红细胞免疫小白鼠,在脾脏内形成激活的B淋巴细胞后,再取脾,制成B细胞悬液。
②混合双亲细胞。将上述两种细胞以合适比例混合。
③促进细胞融合。可用PEG或仙台病毒促融。
④淘汰未融合细胞。处理后的细胞分装在塑料板微孔内,在HAT选择性培养液中培养,未融合的细胞因不能合成核酸死亡,存活者为融合细胞,经产物鉴定后,留下优良的单克隆抗体生产株。
⑤杂交瘤细胞的扩大培养。可通过注射入动物体内增殖,也可在组织培养瓶或细胞培养罐内做扩大培养。

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