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(简答题)

简要阐明胰Rnase A的活性部位如何确定?

正确答案

用化学修饰法研究Rnase A活性的必须氨基酸残基。在pH5.5下,用等摩尔碘乙酸处理Rnase A,羧甲基化的His119是主要产物,而羧甲基化的His12产物较少。Rnase A中其他组氨酸对这个试剂的反应弱得多。所得Rnase A的两个羧甲基化的衍生物均无活性,因此可推测His119和His12为酶活性的必需基团。2,4二硝基氟苯可选择地同酶Lysε-NH2反应,酶引起失活。该结果表明Lys41也是酶活性部位的必需氨基酸。以上研究结果可认为His119、His12、Lys41构成了Rnase A的活性部位。

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