1)空白按检验方法的要求统一采用新西兰奶粉做,溶解时采用温热的水,冷却后再定容。
2)吸取样品时采用10mL移液管,每次换吸样品所用移液管都必须保持干净,再用样液涮洗2-3次。
3)用蒸馏水定容到50mL容量瓶中摇匀后再进行离心。
4)离心脱脂后用干净干燥的4层纱布进行过滤。
5)用5mL移液管吸取滤液,每次换吸时都用蒸馏水涮洗多次。
6)用1mL的刻度吸管吸取冰乙酸并且将此管作为专用管待用,摇匀。
7)用1mL的刻度吸管吸取B试剂并且将此管作为专用管待用,摇匀后离心。
8)用2mL的刻度吸管吸取离心好的上清液于干净干燥的试管中(试管容积较大促进反应),每次吸样时都换管,而且管必须是干净干燥的(清洗后自然晾干)。
9)用5mL刻度吸管加入无水乙醇并且将此管作为专用管待用。
10)反应到规定时间进行比色,比色时用一个比色皿。
11)采用无水乙醇的方法,要求比色时立刻读数,因为无水乙醇在检测高吸光度样品时具有不稳定性。
12)做曲线时,吸光度值(OD)值范围尽量大一点,取0.1—1这个范围最好,超过1就不准了,回归时最好用一元二次回归效果比较好。
13)离心脱脂的时候,牛奶的温度低一点比较好,利于脱脂。(10℃以下为好)
14)标准糊精的品种越多越好,充分混匀后称量一定要准确。
15)如做定性检测,待测样不需稀释。